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SPJ-150數(shù)顯生化培養(yǎng)箱于多管發(fā)酵法的使用要點

更新時間:2017-09-11      點擊次數(shù):3567
  SPJ-150數(shù)顯生化培養(yǎng)箱具有計時器功能,培養(yǎng)箱適用于在廣闊溫度范圍內的復雜用途,也可以在交叉溫度的場合,是采用內腔預熱技術應用在廣闊溫度范圍內的復雜用途和交替溫度的場合。
  發(fā)酵管內裝有單倍或三倍乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,并在內倒置有小玻璃管。培養(yǎng)液中加入溴甲酚紫作為酸度指示劑,細菌產酸后,培養(yǎng)液即由原來的紫色變成黃色。產酸產氣的發(fā)酵管表明試驗陽性,如在倒管內產氣不明顯,可輕拍發(fā)酵管,有小氣泡升起為陽性。
  1.培養(yǎng)溫度的要求
  總大腸菌群中的細菌除生活在腸道中外,在自然環(huán)境中的水與土壤中也經常存在,但此等在自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的zui合適溫度為25℃左右,如在37℃培養(yǎng)則仍可生長,但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃,則不再生長,而直接來自糞便的大腸菌群細菌,習慣于37℃左右生長,如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長。因此,可用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分。將接種好的樣品或裝有濾膜的培養(yǎng)基放入生化培養(yǎng)箱時,SPJ-150數(shù)顯生化培養(yǎng)箱內溫度一定要達到所要求的溫度時,方可放入。如用恒溫水浴箱時,其水面要高于接種物面,放濾膜的培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部。
  2.加氯水樣的處理
  經氯處理消毒過的水樣,水中含有一定量的余氯,使大腸菌群處于受損或受抑制狀態(tài),在采集水樣時應提前在采樣瓶中加硫代硫酸鈉,硫代硫酸鈉可以脫氯,使受損的細菌得以復蘇與修復,從而避免出現(xiàn)計數(shù)結果偏低甚至假陰性的現(xiàn)象。此外余氯對濾膜法培養(yǎng)的細菌其抑制作用尤為明顯,所以抽濾時應對水樣進行大量無菌水稀釋,以減少余氯的殘留。
  3.樣品的保存
  采樣用的容器使用前應蓋好瓶蓋,用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好,置干燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min。采樣后水樣的正確保存也很重要,如保存不當可使樣品中的大腸菌群細菌死亡或在一定條件下再生長,這些都將影響檢測結果的準確性。檢測室接到水樣后,應立即檢測,如因故不能檢測時,應立即將樣品置于冰箱內(2℃-10℃)并于2小時內檢測。
  4.SPJ-150數(shù)顯生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)物質的制備與保存
  ①多管發(fā)酵法所使用的培養(yǎng)液在分裝于各發(fā)酵管中后,應將發(fā)酵管盡快放于高壓蒸汽滅菌器中,在115℃滅菌20min,然后貯存于冰箱或暗處備用。
  ②濾膜法所采用的培養(yǎng)基多使用外購的成品,培養(yǎng)基中苯胺藍的純度和質量往往影響菌落的顏色,因此,無菌包裝的成套培養(yǎng)基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對比菌落的顏色,來鑒定其穩(wěn)定性。
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